細胞外囊泡(EVs)在臨床治療中有多種應用。然而，目前分離血漿EVs的技術存在程序繁瑣和產量有限的問題。

2022年11月20日，南方醫(yī)科大學李博、陳金香及鄭磊共同通訊在Journal of Extracellular Vesicles（IF=17）在線發(fā)表題為“Rapid and efficient isolation platform for plasma extracellular vesicles: EV-FISHER”的研究論文，該研究開發(fā)了一種血漿胞外囊泡的快速高效分離平臺：EV-FISHER。該平臺由具有可裂解脂質探針（PO43?-間隔物-DNA-膽固醇，PSDC）。EV-FISHER 通過膽固醇從血漿中引誘EVs，并用普通離心機將它們分離。捕獲的EVs可以在隨后通過脫氧核糖核酸酶I切割PSDC時釋放和收集。

EV-FISHER 在時間（40-240 分鐘）、隔離效率（74.2%-18.1%）和隔離要求（12，800 g-135，000 g）方面明顯優(yōu)于超速離心（UC）。除了在血漿中的穩(wěn)定性能外，EV-FISHER還表現(xiàn)出與下游單EV流式細胞術的出色兼容性，能夠鑒定glypican-1（GPC-1）EVs，用于乳腺癌隊列的早期診斷，臨床階段分化和治療效果評估。這項工作描繪了一種有效的策略，將EVs從復雜的生物體液中分離出來，具有促進基于EVs的治療診斷學的潛力。

細胞外囊泡(EVs)是由所有類型的細胞以進化保守的方式釋放的磷脂雙層包圍的顆粒，范圍在30到1000納米之間。越來越多的證據(jù)表明，EVs在細胞間通信、疾病發(fā)展和進展中發(fā)揮著重要作用。特別是EVs攜帶豐富的生物分子，如蛋白質、核酸、脂類等，具有作為下一代生物標志物的極好潛力。然而，大小不一的EVs存在于生物液體中，例如血漿、血清、尿液和唾液，其中非EVs生物分子占主導地位。

因此，開發(fā)一種有效的方法將EVs從復雜流體(如血漿)中分離出來是一項艱巨的挑戰(zhàn)。目前，從血漿中分離EVs最常用的方法是差分超速離心(UC)。然而，UC是耗時的，并且會同時分離蛋白質聚集物等污染物。因此，如何以臨床友好的方式分離出產量較高的血漿EVs仍然是一個挑戰(zhàn)。

EV-FISHER合成示意圖和血漿EVs分離工作流程示意圖（圖源自Journal of Extracellular Vesicles ）

最近，一種脂質納米探針已被開發(fā)用于靶向EVs的磷脂雙層以促進其分離。與傳統(tǒng)的EVs識別元件相比，脂質納米探針通過靶向EVs的磷脂雙層而不是特定的表面生物大分子(CD63，CD9，磷脂絲氨酸等)捕獲EVs。另外，脂質探針和EVs膜之間強烈的疏水相互作用有望產生有效的結合。

因此，這種基于脂質的策略在分離總EV群體方面具有優(yōu)勢，從而為臨床判斷提供了全面的樣本信息。最近，一個抗體輔助的MOF平臺已經(jīng)被開發(fā)用于 EVs 分離，命名為 Tim4@ILI-01。然而，這種策略仍然需要費力的修改和長時間的隔離(> 2小時)。因此，基于MOFs的快速高效的EVs隔離平臺在很大程度上仍未被開發(fā)。

在此，該研究報告了一個稱為EV-FISHER的MOF平臺，用于EVs 的快速富集和分離。由于這種分離策略的精巧設計，所提出的基于MOF的EV分離平臺可以在可用的商業(yè)試劑的臨床實驗室中重復使用。這項工作為在一般臨床實驗室中快速有效地分離血漿EV以進行下游分析提供了一種有前途的策略。